环瓜氨酸肽CCP的应用
2023.07.18
类风湿关节炎(rheumataid arthritis，RA)是一种以慢性关节炎为特征的系统性自身免疫性疾病，RA目前还没有能彻底治愈的方法，该病如不及时诊断治疗，即可出现软骨和骨的侵蚀性病变，造成关节结构破坏，最终发展成为关节畸形、强直，导致不同程度的残疾，因此早期诊断至关重要。
RA的诊断主要依靠特征性的临床表现、实验室检查及影像学检查。而目前的诊断均依据1987年美国风湿协会修订的RA分类诊断标准，其中临床实验室诊断最常用的是检查血清中的类风湿因子(rheumatoid factor，RF)，由于RF受某些抗原、抗体物质的干扰，常出现假阳性，特异性不高，常常只能根据临床症状和x线表现诊断，从而导致误诊和漏诊，因此人们一直在寻找特异、敏感的实验室指标以助诊断。
2000年，国外首次报道，根据 filaggrin 的 cDNA序列合成一条含瓜氨酸的环肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)并用于ELISA检测，发现其对RA具有很好的敏感性和特异性，可用于RA的诊断，抗CCP抗体的检测为RA的早期诊断提供了良好的血清学指标，目前国内正在逐渐开展临床应用。
CCP（cyclic citrullinated peptide，环瓜氨酸肽）指的是瓜氨酸是类风湿病患者血清中抗丝聚蛋白相关抗体识别的主要组成性抗原决定簇成分。
瓜氨酸环肽采用CCP为抗原基质检测类风湿患者血清中的抗CCP抗体，具有较高的敏感性和极高的特异性。有研究提示抗CCP参与了类风湿发病过程。除此之外，抗CCP抗体阳性的类患者更容易出现关节的骨质损坏。因此，抗CCP抗体阳性者的愈后可能较差，应采取更积极的治疗措施。
抗CCP抗体对RA具有较好的敏感性(46.6%)和较高的特异性(96.6%)，其高的特异性有利于RA的 确诊。另外还有报道[5]，CCP抗体在 RA诊断中其敏感性较RF低（P<0.05)，特异性较RF高，有显著性差异(P<0.01)，抗 CCP抗体联合检测在诊断﹐RA时，能使敏感性提高到86.7%，特异性提高到98.6%，联合抗CCP抗体和 RF可以提高诊断的准确性，对―RA的早期诊断具有重要意义。还有研究结果显示[6]，发病2年内的患者和发病 2年以上的患者相比抗 CCP抗体阳性率差异没有显著性，进一步说明抗 CCP抗体是类风湿关节炎早期诊断的重要指标。另外，抗CCP抗体在 RA与系统性红斑狼疮(SLE)中的阳性率有显著性差异(P<0. 01);抗CCP抗体在RA 与SS. OA、AS、PsA中的阳性率也有显著性差异(P<0.025)，提示抗CCP抗体对RA有很好的特异性。
抗CCP抗体的敏感性及特异性如图所示：
抗CCP抗体诊断RA已获得国内外的认可
美国风湿病学会(ACR):与其他RA诊断标准相比，未鉴别的关节炎患者中检出抗CCP可准确预测将来患者发展为RA。
欧洲抗风湿联盟(EULAR):建议有早期关节炎向风湿病科医生就诊的每个患者，应当测定下列可预测持续和侵蚀性病变的因子:
有触痛和肿胀的关节的数量ESR或CRP
2010年《类风湿关节炎诊断和治疗指南》:关于RA的实验室检查指出:抗CCP抗体对RA的诊断和预后评估有重要意义。
目前国内外市场上的抗环瓜氨酸肽抗体检测试剂盒主要应用酶联免疫吸附法（ELISA法），它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比，可定性或定量检测患者血清中抗CCP抗体。
ELISA法检测具有特异性高、价格低廉的优点，但是一般采用手工操作，操作繁琐效率低，且人为影响因素大，结果只能定性或不精确地定量。因此，在这高效率的自动化时代，特异性高、操作简便的全自动化检测方法必将有良好的市场前景。目前国内已有体外诊断试剂公司开发出采用 “胶乳增强免疫比浊法”检测的抗环瓜氨酸肽抗体试剂盒，并已投入临床应用。
而“胶乳增强免疫比浊法”是将待测物质相对应的抗体或抗原包被在直径为15－60nm的胶乳颗粒上，使抗原抗体结合物的体积增大，光通过之后，透射光和散射光的强度变化更为显著，从而在免疫比浊法的基础上提高试验的敏感性。
相对于“ELISA法”，“胶乳增强免疫比浊法”操作简单，抗干扰性更强，且可测线性范围也更宽，能利用普通的生化分析仪进行检测，容易实现自动化，可在各级基层医疗机构普及和应用。
